Культивирование стволовых клеток – это кропотливый и трудоемкий процесс. Клетки капризны : им нужна строго определенная температура, процент углекислого газа в окружающем их воздухе, абсолютная стерильность, периодическая замена питательной среды, ежедневный микроскопический контроль и своевременный пересев, дорогостоящие ростовые факторы и фетальная бычья сыворотка. Искусство культуральщика заключается в том, чтобы вовремя “рассадить” клетки по флаконам, иначе вступает в силу закон контактного торможения роста, и стволовые клетки становятся на путь необратимой дифференцировки. Другими словами, если еще вчера во флаконе был хороший, ровный, однородный но плотный монослой стволовых клеток, то сегодня там может быть и сокращающиеся клетки сердечной мышцы, и кость, и жировые клетки и хрящ и т.д. Еще культуральщики отмечают, что клетки хорошо и быстро растут у пациентов, перенесших механическую травму (т.е. острый процесс), и медленно и долго у людей, длительно страдающих хроническими заболеваниями.У детей и молодых людей также наблюдается быстрый рост по сравнению с пожилыми людьми. А еще культуральщики замечают, что работая с клетками надо иметь хорошее настроение. Среди наших пациентов много таких, которые получали сначала аллотрансплантацию клеток (т.е. донорские ), а затем через 1,5 – 2 года обращались с просьбой получить аутотрансплантацию, т.е. свои собственные клетки. Так вот, у этих людей, даже и пожилых, клетки росли гораздо быстрее, нежели положено в их возрасте.
В лаборатории клеточных технологий РГМУ в настоящее время ведется культуральная работа по следующим гуманизированным клеточным препаратам: аутологичные стромальные клетки красного костного мозга аутологичные фибробласты кожи стромальные клетки пуповины человека культура аллогенных фибробластов культура аллогенных остеобластов аллогенные стромальные клетки плаценты
Клеточные культуры, выделенные из тканей животных ( для доклинических исследований): теломеризованные клеточные культуры прогениторные клетки эндотелия сосудов нейральные прогениторы.
Необходимо отметить, что биоматериалы ( костный мозг, кожа, кровь), поступающие в лабораторию строго тестируются на наличие возбудителей инфекционных заболеваний методами ИФА и ПЦР. Если в биоматериале выявляется напр. Вирус гепатита В или С, то данный материал забраковывается и уничтожается. Производится и криосохранение стволовых клеток.
|